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工具細胞株具有高轉(zhuǎn)染率、實驗周期短的特點

細胞株通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的培養(yǎng)物稱為細胞株，是用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法，由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質(zhì)或標志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。特殊性質(zhì)或標志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。對于人類腫瘤細胞，在體外培養(yǎng)半年以上，生長穩(wěn)定，并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。細胞株的建立實驗是通過細胞與低劑量的藥物長期接觸，引起細胞本身生物化學過程的改變，細胞膜上出現(xiàn)Pgp(或P-170)糖蛋白，使細胞逐漸對藥物耐受。工具...

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標記細胞株的分離和培養(yǎng)要注意些什么？

標記細胞株是細胞系中特定標簽（Luc、GFP、RFP等）的穩(wěn)定轉(zhuǎn)移，該細胞系可用作示蹤細胞，為細胞成像和體內(nèi)成像提供了很大的便利。標記細胞株的分離和培養(yǎng)：1、在無菌條件下，取出1-3DSD大鼠的心房組織，然后用PBS清洗組織塊兩次，然后將組織切成1mm3左右；2、在組織塊中加入4ml酶消化液（0.1%胰蛋白酶和0.1%Ⅰ型膠原酶），懸停10s，37℃消化10min，然后用滴定管吹成單細胞懸液，自然沉淀收集取上清，用10%fbs培養(yǎng)基消化終止后置于4℃；3、剩余組織加入3～4m...

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細胞凋亡檢測基于形態(tài)學的方法要怎么操作？

凋亡或者說程序性細胞死亡，是細胞內(nèi)建的防御機制之一，在生物的正常發(fā)育及疾病抵御中起到重要的作用。凋亡過程與通路的異常，會導致多種疾病，包括腫瘤。目前至少有十數(shù)種檢測細胞凋亡的方法，從大框架上講，可以劃分為基于細胞形態(tài)、生物學功能和生化標記三大類。那么細胞凋亡檢測基于形態(tài)學的方法是怎么操作的呢？1、電子顯微鏡檢查“凋亡”是一個細胞形態(tài)學概念。因此，鑒定凋亡的金指標，往往是基于形態(tài)學的。凋亡和另外一種主要的細胞死亡類型“壞死”有著顯著的亞細胞形態(tài)差異。簡而言之，在透射電鏡下，凋亡...

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細胞培養(yǎng)常見問題和解答

在制藥行業(yè)，細胞培養(yǎng)已成為抗體生產(chǎn)的重要組成部分。細胞培養(yǎng)技術已被用于生產(chǎn)針對輪狀病毒、脊髓灰質(zhì)炎、天花、肝炎、風疹和水痘的抗體?；诩毎牧鞲锌贵w也已獲準在美國和許多歐洲國家使用。那么細胞培養(yǎng)的前景如何？3D細胞培養(yǎng)出于多種原因，對2D細胞培養(yǎng)的需求正在增加。2D細胞培養(yǎng)方法包括在平面上將細胞培養(yǎng)成2D單層。二維貼壁細胞培養(yǎng)從根本上限制了細胞的產(chǎn)生。研究人員提出了3D細胞培養(yǎng)來解決這些問題。這些培養(yǎng)物已被證明在一些基本生物學機制的研究中是有效的，例如細胞數(shù)量監(jiān)測、細胞活力、...

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細胞凋亡檢測的常用檢測方法有這幾種

要了解細胞凋亡檢測方法，首先要了解細胞凋亡的形態(tài)學變化，形態(tài)學觀察表明細胞凋亡的變化是多階段的。細胞凋亡往往涉及多個細胞，甚至少數(shù)細胞也異步發(fā)生。首先細胞體積縮小，連接消失，與周圍細胞分離，然后細胞質(zhì)密度增加，隨后會發(fā)生一系列變化：線粒體膜電位消失；滲透率變化；將細胞c釋放到細胞質(zhì)中；核質(zhì)濃度、核膜和核仁碎裂；DNA被降解成180bp-200bp左右的片段，在細胞膜內(nèi)形成囊泡；絲氨酸膜表面轉(zhuǎn)向磷脂膜內(nèi)側(cè)；細胞膜結(jié)構仍然完好無損?？梢詫⒌蛲黾毎臍埡》指畎扇舾蓚€凋亡小體而不...

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3D細胞培養(yǎng)技術具有哪些實際意義？

作為生命科學領域的一項長期技術，二維細胞培養(yǎng)使人類能夠在體外研究細胞的生理和病理。然而，隨著對細胞微環(huán)境概念的逐漸了解，科學家發(fā)現(xiàn)二維培養(yǎng)細胞的生理狀態(tài)和活性與體內(nèi)細胞并不*一致，結(jié)果往往與動物實驗和臨床結(jié)果不一致。實驗。因此，在過去的十年里，科學家們一直致力于開發(fā)各種3D細胞培養(yǎng)技術，為細胞提供更類似于體內(nèi)環(huán)境的培養(yǎng)環(huán)境。研究人員逐漸意識到，為了在體外實現(xiàn)細胞的形態(tài)、結(jié)構和生理功能，3D細胞培養(yǎng)需要能夠模擬體內(nèi)環(huán)境的關鍵特征，包括細胞、細胞和細胞外基質(zhì)之間的相互作用，以及細...

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對于耐藥細胞株的培養(yǎng)方法你了解多少？

耐藥細胞株在長期保存和傳代過程中受到各種不穩(wěn)定因素的影響，例如，細胞遺傳污染和基因變異。因此，經(jīng)過一段時間后，細胞的遺傳物質(zhì)可能發(fā)生變化，導致其生物學特性發(fā)生變化，從而降低動物模型的一致性和可比性。因此，為了保證動物模型的穩(wěn)定性，必須對細胞株的質(zhì)量進行監(jiān)測。那么你對它的培養(yǎng)方法了解多少？所有轉(zhuǎn)染腫瘤和病毒的細胞都被認為具有潛在的生物危害，必須在二級生物安全平臺上操作，請注意防護。所有與該單元接觸的廢液和容器只能在高壓滅菌后丟棄。收到耐藥細胞株后，用倒置透鏡觀察整個細胞的生長情...

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什么原因會導致胎牛血清FBS沉淀？

胎牛血清FBS是一種性能強的血清產(chǎn)品，適用于精細細胞系的培養(yǎng)，使用3次0.1μM過濾方法和40多項質(zhì)量控制測試。經(jīng)細胞培養(yǎng)試驗，該產(chǎn)品可用于腫瘤細胞、淋巴細胞、雜交瘤、內(nèi)皮細胞等。經(jīng)過多道分離純化過濾工藝，質(zhì)地純凈，內(nèi)毒素等免疫原性蛋白含量極低，適用于各種細胞的取樣培養(yǎng)，尤其是干細胞、原代細胞和其他血清依賴性高的細胞（如胚胎干細胞、骨髓間充質(zhì)干細胞和星形膠質(zhì)細胞），以及其他高要求的實驗研究對于血清質(zhì)量。胎牛血清FBS解凍要求：1、請在2℃～8℃的環(huán)境中解凍，不宜在較高溫度解凍...

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